Ланчана реакција полимеразе (ПЦР) је једна од најпознатијих метода у лабораторијама природних наука.
ПЦР плоче су направљене од првокласне пластике за одлично руковање и анализу прикупљених узорака или резултата.
Имају танке, уједначене зидове који обезбеђују прецизан пренос топлоте.
У припреми за примену у реалном времену, мале фракције ДНК или РНК се изолују и чувају у ПЦР плочама.
ПЦР плоче су веома ефикасне у топлотном заваривању и такође ограничавају проток топлоте.
Међутим, пошто су ПЦР плоче ефикасне и поуздане, склоне су грешкама и нетачностима приликом обраде узорака.
Дакле, ако сте заинтересовани за набавку квалитетних ПЦР плоча. Најбоље је контактирати поузданог произвођача ПЦР плоча. Уз ово, можете бити сигурни да ћете добити најбољу цену.
Испод су неке мере предострожности како би се избегла контаминација реагенса или узорака и спречили нетачни резултати.
Дезинфикујте околину
Нетачни позитивни или негативни резултати због присуства нечистоћа могу довести до сумње у резултате.
Нечистоће и загађивачи долазе у различитим облицима, као што су неповезани ДНК или хемијски адитиви, који на крају смањују ефикасност и ефективност реакције.
Постоји много начина да се у великој мери смањи стопа контаминације ПЦР плоча.
Коришћење стерилизованих врхова филтера је још један користан начин да спречите нечистоће да уђу у узорак кроз пипету.
Потпуно чист сет опреме, укључујући пипете и полице, обезбеђен је посебно за ПЦР употребу. Ово ће гарантовати занемарљив пренос нечистоћа или загађивача око лабораторије.
Користите избељивач, етанол на пипетама, полицама и клупама да обришете контаминацију.
Одредите резервисани простор за све ПЦР реакције како бисте додатно смањили контаминацију честицама.
Користите чисте рукавице на сваком кораку и често их мењајте.
ПЦР плоча
Проверите концентрацију и чистоћу шаблона.
Треба одржавати чистоћу клупа и опреме која се користи за анализу узорака помоћу ПЦР-а. Од кључне је важности да се провери чистоћа узорака пре анализе и обраде.
Обично анализатор узима у обзир концентрацију и ниво чистоће узорка ДНК.
Однос апсорбанције од 260нм/280нм не би требало да буде мањи од 1,8. Нечистоће су затим идентификоване коришћењем таласних дужина између 230 нм и 320 нм.
У једном примеру, хаотропне соли и друга органска једињења су детектовани при апсорбанцији од 230 нм. Истовремено детектујте и верификујте замућеност у узорцима ДНК при апсорпцији на 320 нм.
Избегавајте преоптерећење ПЦР плоча и производа
Иако је пожељно покренути више производа у исто време, то може довести до унакрсне контаминације ПЦР плоча.
Преоптерећење ПЦР плоча различитим производима је расипно и отежава идентификацију узорака.
Водите евиденцију аликвота ПЦР реагенса
Непрекидни циклуси замрзавања/одмрзавања и честа употреба аликвота могу оштетити ПЦР реагенсе, ензиме и ДНТП рекристализацијом.
Увек настојите да пратите стопу аликвота који се користе приликом припреме узорака за анализу.
Пожељни ЛИМС је погоднији за контролу залиха и количина реагенаса и узорака који се замрзавају или одмрзавају.
Изаберите оптималну температуру жарења.
Избор и коришћење погрешне температуре жарења је још један начин на који резултати ПЦР-а садрже грешке.
Понекад одговор не иде по плану. Температуру жарења треба снизити да би се подстакла успешна реакција.
Међутим, снижавање температуре повећава могућност лажних позитивних резултата и прајмер-димера.
Када користите ПЦР плоче, важно је потврдити анализу криве топљења јер је то добар показатељ за избор исправне температуре жарења.
Софтвер за дизајн прајмера помаже дизајну, обезбеђујући тачну температуру жарења, директно смањујући грешке у ПЦР плочама.
пцр плоча
