Примена бочице серума
Бочица серума је направљена од боросиликатног стакла ниске екстракције, а безбојна прозирна боца испуњава захтеве УСП типа И и АСТМ Е 438 типа И стандардне класе А. Може се аутоклавирати на 121 степен током 20 минута и може се поделити на 125 мл , 250мл, 500мл, 1Л, 2Л према запремини.
Боца са серумом је контејнер за складиштење серума, који је углавном направљен од ПЕТ материјала поступком убризгавања растезљивим дувањем. Медијум је хранљива материја потребна за раст ћелија. Према свом извору, подељен је на синтетички медиј и природни медиј, од којих се оба могу чувати у бочицама са серумом.
Бочица са серумом
Природни медијум:
Најчешће коришћени природни медиј је серум, у основи телећи серум. Серум садржи различите факторе раста ћелија, факторе који подстичу адхезију и њихове мултиактивне супстанце. У комбинацији са синтетичким медијумом, ћелије се могу размножавати и несметано расти. Серум треба да се чува у специјалним бочицама са серумом на -5 степену до -20 степену.
Синтетички медијум:
Синтетички медијум је стриктно формулисан према врсти и количини супстанци које ћелије захтевају. Постоји много врста и познатих компоненти, што олакшава контролу експерименталних услова. Садржи угљене хидрате, аминокиселине, липиде, неорганске соли, витамине, елементе у траговима и факторе раста ћелија. Међутим, у поређењу са природним медијумом, неке природне непознате компоненте не могу се заменити познатим хемијским компонентама. Према томе, основни синтетички медијум који се користи у ћелијској култури мора такође додати одређену количину природних компоненти медијума да би се превазишла синтетичка култура. Недовољна база, најчешћа пракса је додавање телећег серума.
Облик бочице са серумом је квадратни, лак за хватање, отпоран на већину киселинске и алкалне корозије, температура кртости је -70 степени, и још увек има одређену жилавост на -30 степени. То је добар контејнер за паковање, било да је природни медиј или синтетичка култура. може се чувати у бочицама са серумом.
За изолацију, културу и идентификацију ендотелних прогенитор ћелија из крви пупчане врпце и успостављање ацелуларних васкуларних скела побољшаном методом замрзавања-одмрзавања
Истражити изводљивост и клиничку примену вредности ендотелних прогениторних ћелија изолованих и култивисаних из крви из људске пупчане врпце.
Методе: Прикупљена је крв из пупчане врпце фетуса који су подвргнути царском резу до краја термина на Одељењу за акушерство и гинекологију, Прве придружене болнице Медицинског факултета Бенгбу, стављена у боцу са серумом која садржи 50У/мл хепарина у асептичним условима, чуване у кутији за лед од 4 степена и транспортоване до ћелија У просторији за културу, мононуклеарне ћелије крви пупчане врпце су добијене центрифугирањем у градијенту густине. Добијене мононуклеарне ћелије су подељене на два дела и додата је медијум М199 феталног телећег серума (ФЦС-М199) и медијум аутологног серума М199 (АС-М199). И посејане су у посуде за културу са и без хуманог фибронектина (ХФН) (означене као: Ф(0), Ф(1), А(0), А(1)). Урађена је ин витро индукција, диференцијација и експанзија.
Уочене су морфолошке промене адхерентних ћелија током читавог процеса индукције и диференцијације, које су идентификоване из различитих углова у комбинацији са сродним техникама као што су имунохистохемија, имунофлуоресценција и проточна цитометрија.
Резултати: После 12 дана културе, мононуклеарне ћелије из крви пупчаника су почеле да се лепе. Након 3д, почео је да се појављује вретенасти облик, а затим се број адхерентних ћелија постепено повећавао и постепено постао вретенаст. Када се култивише до једне недеље, формира се типична колонија са вретенастим ћелијама око и округлим ћелијама у центру. Када су ћелије култивисане 14 дана, међусобно повезани ћелијски кластери су се постепено повезивали и формирали структуру налик мрежи. У исто време, са континуираним повећањем времена култивисања, дугачке вретенасте ћелије су такође почеле да се постепено скраћују и показивале су типичну промену налик камену за поплочавање.
Адхерентне ћелије су култивисане недељу дана и примећено је да је број ћелија у медијуму са хуманим фибронектином био значајно већи од броја ћелија без хуманог фибронектина, и није било значајне промене у броју ћелија у два различита медијума.