Šta je značenje PCR detekcije nukleinske kiseline, metode i koraci
Testiranje nukleinske kiseline je trenutno efikasan način da se utvrdi da li virus nosi novi koronavirus. Trenutno ljudi uglavnom koriste briseve nosa, briseve grla i serum antitela lgm za referencu. Ali prema najnovijim zahtevima za ulazak u Singapur, vrši se PCR testiranje nukleinske kiseline, pa šta znači PCR testiranje nukleinske kiseline?
Šta znači PCR detekcija nukleinske kiseline
PCR označava lančanu reakciju polimeraze, koja se može koristiti za amplifikaciju DNK, tako da se amplifikuje mala količina DNK do te mere da se može detektovati. Nukleinska kiselina nekih virusa je DNK i ovaj metod se mora koristiti za detekciju. Dakle, PCR nije izvršena provera, već metod detekcije DNK. Na primer, kvantifikacija DNK virusa hepatitisa B koristi ovaj metod. Svrha DNK inspekcije je da se dijagnostikuje bolest s jedne strane. Ako se čak i DNK patogena može otkriti, to znači da je patogen inficiran; s druge strane, treba proceniti koliko se virus razmnožio, kako bi se procenila težina bolesti ili efekat lečenja.
Metode i koraci PCR detekcije nukleinske kiseline
Testiranje nukleinske kiseline zahteva pet koraka: uzorkovanje, zadržavanje uzorka, zadržavanje, ekstrakcija nukleinske kiseline i kompjutersko testiranje.
Prvi korak u detekciji nukleinske kiseline je sakupljanje ljudskog sekreta, i brisanje nosne šupljine ili zadnjeg zida ždrela i bilateralnih faringealnih krajnika nazalnim testom ili faringealnim testom.
U drugom koraku, medicinsko osoblje je zadržalo uzorak, potopilo glavu testa u rastvor za konzervaciju ćelija i zašrafilo poklopac epruvete odmah nakon lomljenja repa.
U trećem delu uzorak stavite u hermetičku kesu, čuvajte i na vreme pošaljite na pregled.
Četvrti korak je slanje uzorka u laboratoriju radi ekstrakcije nukleinske kiseline.
U petom koraku, ekstrakt se podvrgava reakciji fluorescentne PCR amplifikacije.
Šta je nukleinska kiselina
Nukleinska kiselina (nukleinska kiselina) je vrsta biološkog makromolekula sastavljenog od nukleotida (nukleotida), podeljenih na ribonukleinsku kiselinu (RNK) i deoksiribonukleinsku kiselinu (DNK), u kojoj je RNK uglavnom jednolančana struktura, DNK je uglavnom dvolančana struktura. Pored priona, nukleinska kiselina je biološki makromolekul neophodan za život. Njegova glavna funkcija je da konstituiše genetski nosilac informacija života. Pored toga, neke nukleinske kiseline se mogu koristiti kao i učestvovati u formiranju biološki aktivnih enzima. Molekule ili druge molekularne mašine.
Šta je testiranje nukleinske kiseline
Detekcija nukleinskih kiselina, kao što naziv implicira, je otkrivanje nukleinskih kiselina.
Koje su jedinstvene prednosti testiranja nukleinske kiseline? Zašto se može koristiti kao"zlatni standard" za dijagnozu novog korona virusa?
U stvari, svaki metod detekcije ima sopstvene scenarije primene. Uzimajući za primer detekciju virusa, objekat detekcije uobičajenih imunoloških metoda detekcije (koloidno zlato, ELISA, hemiluminiscencija, itd.) je antigen ili antitelo virusa, što je ekvivalentno"bočnom crtežu". Pošto postoji vremenski okvir od infekcije do otkrivanja, imunološke metode detekcije generalno nisu pogodne za ranu dijagnozu.
Šta je značenje PCR detekcije nukleinske kiseline, metode i koraci
Lažni pozitivni i lažni negativni
1. Lažno pozitivan
Obično ima manje lažnih pozitivnih rezultata. Generalno, nepravilan rad laboratorijskog osoblja može dovesti do unakrsne kontaminacije između uzoraka ili rezidualne kontaminacije amplificiranih proizvoda. U ovom slučaju može doći do lažnih pozitivnih rezultata.
Međutim, lažno pozitivni rezultati se mogu efikasno zaobići strogom kontrolom procesa detekcije i primenom strategije nasumičnog učešća u detekciji nekoliko negativnih uzoraka.
2. Lažno negativan
Ono što ovde treba objasniti je da lažni negativni rezultati u PCR detekciji i klinički lažni negativni rezultati zapravo nisu isti koncept.
Uzimajući za primer dijagnozu novog korona virusa, o kojoj se intenzivno raspravlja na internetu, klinički lažni negativni rezultati se odnose na slučajeve u kojima se sumnja da su klinički simptomi i slikovne studije zaraženi, ali je PCR test više puta ili uvek negativan; a PCR test lažno negativan se odnosi na prikupljeni U uzorku postoji dovoljna količina novog koronavirusa, ali nije otkriven.
Da bi se izbegli lažni negativni rezultati u testiranju nukleinske kiseline, glavne stvari koje treba rešiti su: (1) ima dovoljno virusa u ćelijama zaražene osobe, (2) ćelije koje sadrže virus mogu se sakupiti u prikupljenom uzorku i (3 ) virus u uzorku je otkriven Ove tri veze.
Među njima, tehnički parametri PCR kompleta uglavnom utiču na treću vezu detekcije.
Samo za treći test link, ako je broj virusa u uzorku ispod određenog nivoa (ispod minimalne granice detekcije), PCR komplet neće moći da ga otkrije. Iz ove perspektive, lažni negativni rezultati u PCR detekciji se ne mogu u potpunosti izbeći. Zbog toga je neophodno dopuniti razvoj testiranja specifičnih antitela za virus.